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ウェスタンブロット法

免疫ブロット法、イムノブロット法ともいう。
電気泳動で分離したタンパク質を疎水性の膜に固定し、抗原に特異的な抗体を用いて目的のタンパク質を検出する方法。
具体的には、まずポリアクリルアミドゲル電気泳動を行って試料のタンパク質を分離し、これをニトロセルロース膜に電気的にブロッティングする。
膜への抗体の非特異的結合を防ぐためにスキムミルクなどでブロッティングを行った後、目的とするタンパク質に対する抗体(一次抗体)を接触させ膜上で抗原抗体複合体を形成させる。これをアルカリホスファターゼなどの酵素で標識した二次抗体検出する。
他に放射性同位体で標識した二次抗体やプロテインAなどで検出する方法もある。
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